El Callistemon speciosus L. es una especie de la familia Myrtaceae de gran interés como planta ornamental y medicinal por su alto contenido de aceites esenciales en sus hojas. La reproducción de esta planta es por semilla y por acodos, estos métodos no siempre tienen éxito. Con el objetivo de establecer un protocolo para la propagación in vitro de esta especie, se evaluaron 5, 10, y 15 min de desinfección de las semillas con bicloruro de mercurio (HgCl2) a 0,2% (m/v), cuatro concentraciones de 6-BAP (0; 0,25; 0,50 y 1,0 mg.L-1) para la multiplicación y cuatro niveles (0; 0,5; 1,0, y 1,5 mg.L-1) de AIA para el enraizamiento de los brotes. Se logró 96% de semillas asépticas al desinfectar con bicloruro de mercurio durante 10 min. El medio sin suplementos de citoquininas fue el mejor para la proliferación de brotes. Por otra parte, se logró100% de enraizamiento de brotes en un medio de cultivo sin suplementos de auxinas. La aclimatización de los brotes se realizó en un sustrato compuesto de zeolita:humus de lombriz (1:1) o humus de lombriz, en condiciones de vivero, con un sistema de riego por microjet.